1. 瘤胃液的采取
晨饲前采取瘤胃液于保温瓶中,通入二氧化碳以排除空气,用两层纱布 粗滤于三角瓶中,向三角瓶通入二氧化碳,在38〜39Y水浴中培养备用。
2. 样品的配制
测定时,要做如下平行测定,即高消化率标准饲草A (2个),低消化 率标准饲草B (2个),空白1 (2个)放置在培养架前位,空白2 (2个) 放置在培养架后位,测定样品每种3个。
3. 消化液的分装
准确称取风干样0.5g,放入80〜90ml玻璃离心管中,置于38〜39T:水 浴中,向每个试管中加40ml缓冲液(NaHCO339. 8g, Na2HPO437. 2g, NaCl 1.88g, KC1 2. 88g, MgCl2 – H20 0.36g, CaCl20. 2g 溶解于 4 000ml 蒸偕水 中)和10ml瘤胃液,摇动混匀,充入二氧化碳,盖上带有放气门的橡皮 塞,放入38~39乞培养箱中培养。
4. 消化培养
加完培养液的样品放入38〜39Y培养箱中培养48小时(每日摇动2〜3 次)。然后加入1ml HgCl2, 2ml Na2CO3, 3 000转/分离心15分钟,倾去上 清液,各管加入50ml盐酸胃蛋白液[胃蛋白酶(1 : 10 000) 10g,浓盐酸 44.5ml,蒸馆水5 000ml],继续在38〜39Y培养箱中培养48小时(每日摇 动2〜3次)。然后离心,水洗,移入50〜100ml已知重量的各地蜗中, 105 Y干燥到恒重。
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