一种含人参多糖的梅花鹿细管冻精稀释液配方及应用方法,由以下步骤完成。该稀释液配方为:人参多糖20mg,Trisl.94g,果糖0.8g,柠檬酸1.08g,卵黄20ml,GSH23mg,BSA91mg,ATP23mg,维生素C284mg,青霉素40万国际单位,链霉素20万国际单位,甘油6ml,加蒸馋水定容到100ml。磁力搅拌,0.22pm滤过灭菌冷藏。根据活力在0.8以上的梅花鹿精子密度确定稀释倍数,将精液与等温的的稀释液在降温前1次混匀(甘油终浓度保证在3%以上)。在0龙冰箱中水浴降温平衡5小时。在冰箱中将平衡好的精液吸入0.25ml细管,聚乙烯醇粉封口,置于液氮面约2cm处,冷冻5分钟,投入液氮中。抽样并在37Y的水浴锅中解冻20秒,镜检,活力0.35以上的精液标记装入纱布袋保存。
(1) 梅花鹿细管冻精稀释液配方以人参多糖20mg,Tris1.94g,果糖0.8g,柠檬酸1.08g,卵黄20ml,GSH23mg,BSA91mg,ATP23mg,维生素C284mg,青霉素40万国际单位,链霉素20万国际单位,甘油6ml为原料构成。
(2) 梅花鹿细管冻精稀释液制备按上述(1)配方,准确称量或量取各原料,加去离子水定容到100ml,磁力搅拌均匀,0.22微米滤过灭菌冷藏。
(3) 细管冻精制备将新采集的活力在0.8以上的梅花鹿精子,根据密度确定稀释倍数,与等温的的稀释液在降温前1次混匀(甘油终浓度保证在3%以上)。在0Y冰箱中水浴降温平衡5小时。在冰箱中将平衡好的精液吸入0.25ml细管,聚乙烯醇粉封口,置于液氮面约2cm处,冷冻5分钟,投入液氮中。抽样并在37龙的水浴锅中解冻20秒,镜检,活力0.35以上的精液标记装入纱布袋保存,即为梅花鹿细管冻精。该稀释液有利于梅花鹿精液的冷冻和低温保存,对提高梅花鹿人工授精的繁殖力有着重要的意义,对开发人参的新用途,也有着重要的价值。含人参多糖的梅花鹿细管冻精稀释液生产方法简单、生产成本低,便于推广应用。
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