(一)胚胎移植的器械
目前家畜胚胎移植尚无商品化的移卵用专业工具,所用的移卵管和吸卵管多半是自制的,最简单的一种是用直径0.6~0.8cm的玻璃管拉成的前端弯曲或直的、内径0.1~0.5cm的吸管,前部要尖锐,后部安装一个橡皮吸球,即可用来进行输卵管移卵。移卵时,先需用一钝针头在子宫壁上刺一个小孔,然后插入移卵管,将卵子注入子宫。也有采取套管移卵办法,即取一个12号针头,将其插注射器的接头除去,同时将其针头磨平,变成一个小的金属导管,接上一段细的硅胶管与吸管,也可用于移植操作。
(二) 移植适宜时间
胚胎移植到受体体内,要求胚胎的发育必须和子宫的生理状态相一致。这既要考虑到供体梅花鹿和受体梅花鹿同期发情问题,又要考虑到胚胎发育与子宫发育关系问题。而子宫的发育是根据黄体的类型特征来判断的。实际上供体梅花鹿提供的卵子是激素处理后超排的,与单个卵子排出时间不完全相同,因此,不能只考虑发情同期化。在移卵前要对受体梅花鹿进行仔细检查,如果黄体发育达到所要求的程度,即使与发情后的天数不吻合也可以移植,反之就不能移植。一般在发情后7d移植。当然,有条件的可以用腹腔镜检查受体梅花鹿黄体的数量和发育程度,以及所处的位置。这样,可不必拉出子宫检查。
(三) 移植操作
卵移植分为输卵管移植和子宫移植两种。原则上由输卵管获得的胚胎,由伞部移入输卵管中,由子宫获得的胚胎,应当移到子宫体前1/3处。吸胚时,先用吸管吸一段营养液,再吸1个小气泡,然后再吸胚胎,吸胚胎后再吸1个小气泡,最后吸一段营养液。这样可以防止在移动吸管时胚胎丢失。输卵管内移植,往往因输卵管系膜的牵连形成弯曲,不利于输卵。输卵前要使输卵管处于平直状态,以便能看到牵出的输卵管部分处于输卵管膜的正上面,并能看见喇叭口的一侧。此时,可以将移卵管前端插入输卵管,把带有胚胎的保存液输入输卵管内。输卵后还要再镜检移卵管,看是否还有胚胎,若没有,说明已移入,将器官复位,做腹壁缝合。子宫内移卵时,是将胚胎吸入移卵管后,再将移卵管插入子宫角,当移卵管进入子宫腔时,会有插空的手感,此时稍向移卵管加压,则移卵管内液体会发生流动。如不动,说明没插入子宫腔,可调整移卵管方向和深浅度后再注入。
(四) 供体和受体母梅花鹿的术后观察
对术后供体和受体,不但要注意它们的健康情况,而且还要留心观察它们在预定时间是否发情。若发情,供体在下次发情时可以照常配种,或者再作供体收集胚胎。一般希望供体母梅花鹿发情,但受体母梅花鹿却相反。如果术后发情,说明未受孕,移植失败。失败的原因是胚胎移植后死去或在移植过程中丢失,或者移植的胚胎本身有缺陷。如果受体未发情,则需要进一步观察,在适当时机进行妊娠检查。如果已确定妊娠,则需加强饲养管理,保证妊梅花鹿健康,使之顺利完成整个妊期,直至产出胎儿。
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