骆驼人工采精——精子的死活鉴别

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精子的死活鉴别是一种常用的鉴定精子活率的方法。其依据的原理是,活精子在一些染料里不着色，只有死精子才着色，用此方法可以区别死活精子并计算所占比例「精子死后,,细胞膜的通透性增加，染色后精子头部后方着色即为死精子，不着色或几乎不着色者为活精子◎ 、
检查精子死活时,常用苯胺黑或苯胺蓝作背景，检查时容易鉴别。常用的方法有以下3种Q
1.伊红苯胺黑染色法取1滴精液滴于载玻片上，再加1滴5%水溶性伊红溶液，用玻棒搅拌均匀，再加2滴苯胺黑（1克苯胺黑加100毫升蒸馋水后混合而成）迅速混合，随后用另一载玻片推成抹片，自然干燥后，在显微镜下观察，活精子不着色，死精子因伊红渗入细胞膜而呈红色。
2.伊红苯胺蓝染色法在ioO毫升磷酸缓冲液中加入1克伊红和1克苯胺蓝，加热过滤后即可使用；检查时加精液1份，加20份染液，在载玻片上制成抹片，而后迅速加热干燥，否则会着色过深。在显微镜下观察,死亡精子头部后方染成红色乃至暗红色,头部的前方染成粉红色或不着色。活精子不着色,在淡青色的背景中可以清楚地看到精子的轮廓。
3.葡萄糖刚果红染色法在100毫升7%葡萄糖溶液中加入1克刚果红，过滤后便可使用。检查时，取精液1份加入上述染液3份进行稀释,然后将稀释过的精液裸存在0笔左右，每隔12-24小时检查1次。检查时先将精液摇匀，取样抹片,在显微镜下观察。死亡精子染成红色，其颜色的深浅因死亡时间的长短而舜，由浅红色到深红色不等，颜色深者表示死亡时间较久。
计算精子死亡率和活精子的百分率时，一般是在高倍镜下检查抹片上的不同视野，计数500个精子，计算着色和不着色精子所占的百分率，即为精子死亡率和活精子的百分率。
精子的染色，一般只进行原精液的检查，而且观察抹片需在24小时内进行。