梅花鹿牛病毒性腹泻防治方法

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本病尚无有效防治办法，主要采取加强管理和对症治疗。平时加强检疫，防止引进病梅花鹿。目前有弱毒疫苗可以免疫，对受威胁地区可以进行免疫。在我国，也有人用猪瘟疫苗注射以保护动物不受此病毒感染。
1.疫苗
(1) 细胞疫苗作者将从吉林省长春市双阳区梅花鹿流产胎儿肝脏病料中分离出的牛病毒性腹泻病毒灭活后制备成油剂灭活苗，免疫接种试验动物后，检测其体液免疫和细胞免疫水平，结果表明：梅花鹿源牛病毒性腹泻病毒(BVDV)分离株油剂灭活苗既能产生特异性体液免疫，又可以产生细胞免疫应答。
(2) 核酸疫苗作者将CCSYD株BVDV的E。基因RT-PCR扩增目的片段进行了克隆和测序，将其与已报道的瘟病毒代表株相应序列做了比较,预测了E。蛋白的抗原表位、亲水性和等电点等。成功构建了原核表达质粒pET28a/E0,重组菌在IPTG诱导下能表达目的蛋白，其含量占菌体总蛋白的9.25%o成功构建了真核表达质粒PAX1/E。，并用脂质体转染BHK-21细胞，RT-PCR法检测到E。目的基因在BHK-21细胞进行了转录，间接ELISA法检测到已表达目的蛋白。用梅花鹿源BVDV基因苗(PVAX1/EO)不同免疫剂量和免疫次数免疫家兔，既可产生体液免疫又可产生细胞免疫应答。基因苗高剂量组比低剂量组体液免疫应答水平和细胞免疫应答水平高，基因苗免疫次数对体液免疫应答水平和细胞免疫应答均无影响。免疫的第42d基因苗免疫组抗体水平达到高峰，基因苗免疫组(免疫剂量lmg/ml以上)BVDV抗体应答水平高于CCSYD灭活苗和C24V灭活苗免疫组，但免疫家兔的28d以前的结果则相反；免疫家兔产生的细胞免疫应答水平基因苗组均低于CCSYD灭活苗和C24V灭活苗免疫组。
(3) 转基因人参发根疫苗采用叶盘法将PBI121/E0导入参发根中,提取转化的人参发根及其继代发根DNA和RNA,通过分子生物学的方法检测E。基因是否整合到人参发根基因组中；提取所培养的人参发根的蛋白质,利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测BVDVEo基因在人参发根中是否得到表达。通过Western-blotting法和ELISA法检测转基因人参发根E。蛋白的免疫原性。对转基因人参发根总皂昔和九种单体皂昔的含量进行了检测。普通人参发根和转基因人参发根中9种单体皂昔均有测出，且转基因人参单体皂昔的含量均高于相应普通人参发根单体皂昔含量；转基因人参发根中单体皂昔含量与普通人参发根比较，Rbl、Rb2、Rb3的含量无显著性差异(P>0.05),Rg］、Re、Rf、Rg2、Rc、Rd的含量差别显著(P<0.05)o对转基因人参发根人参多糖的含量进行了检测。转基因人参发根粗多糖含量(9.4%)大于普通人参发根中粗多糖的含量(7.6%),差异显著(P<0.05)。结果表明：成功将BVDV基因Eo转入人参发根中并得到了表达;BVDVEo基因在人参发根中表达的蛋白具有免疫原性；转基因人参发根中总皂昔、9种单体皂昔和人参多糖的含量均高于普通人参发根。此研究为植物疫苗的开发提供了新的思路，并为转基因人参发根疫苗的研究与开发奠定了基础。
(4)转基因黄芷疫苗作者是以牛病毒性腹泻病毒RNA为模板，用反转录-聚合酶链式反应法获得其Eo基因，再构建其基因Eo重组植物表达载体，然后采用花粉管通道法，得到牛病毒性腹泻病毒E。基因转化黄苗。通过蛋白质印迹法和酶联免疫吸附法筛选具有免疫源性的牛病毒性腹泻病毒基因E。转化的黄芷，得疫苗产品。本发明的有益效果是：将牛病毒性腹泻病毒E。基因在黄英中表达，既产生保护性抗原又产生增强免疫作用的佐剂物质，提高了黄芷抗病毒的作用和疫苗的免疫效果。还有易生产、使用方便、稳定性强、无副作用的优点。
2.中药防治
作者采用组织细胞培养方法，测试了利巴韦林、黄芷、鱼腥草、干扰素a2b、莪术油、双黄连粉针剂在MDBK细胞体外培养中的最大安全浓度(最低稀释度)分别为(2)、⑵)、⑵)、⑵)、⑵)、⑵)。药物抗梅花鹿源BVDV作用由强到弱的顺序：莪术油、鱼腥草、黄苗、干扰素、利巴韦林、双黄连。作者研究证明人参皂昔、五味子乙素也有抗BVDV作用。