梅花鹿大豆制品抗胰蛋白酶活性的测定

梅花鹿,梅花鹿产仔,梅花鹿价格,梅花鹿养殖,梅花鹿幼崽,鹿茸,鹿产品

称量50mg研细的大豆制品于三角瓶中，每瓶加入10ml的0.01mol/L氢氧化钠溶剂。在lh内，时而摇动内容物，然后过滤。上清液分别以0ml,0.5ml,1.0ml,1.5ml和2ml的体积分装于试管中。每管加入Tris缓冲液至2ml。另用一试管加入2mlTris缓冲液作空白对照，除空白对照试管外，每试管中加2ml胰蛋白酶溶液。将全部试管置于37龙水浴中，当温度平衡后,每试管中加5mlPABA试剂。lOmin后，每试管中加1ml醋酸溶液，然后在空白对照试管中加入2ml胰蛋白酶溶液，所有试管的溶液用滤纸过滤。然后用空白调节分光光度计零点，在410nm测定样品过滤液的吸光度，每ml大豆制品浸出液光密度的变化可用回归法计算出来。样本抗胰蛋白酶活性，以抗胰蛋白酶单位表示，抗胰蛋白酶单位是以每10ml反应液改变0.01吸光度值为1个单位。Tris缓冲液为6.05g羟基甲基氨基甲烷和2.22gCacl2溶解于约900ml蒸偕水中，用HC1调节pH值至8.2然后将此溶液转移至1000ml容量瓶中，用蒸馅水稀释至1000mloPABA为4ml苯甲酰DL精氨酸-P-硝苯基盐酸化合物溶解于1ml二甲亚碰，并预热至37T,Tris缓冲液稀释至100mlo姨蛋白酶溶液为将4mg无盐胰蛋白酶溶解于200ml的0.001mol/LHC1。