1. 准备工作根据我们的研究,双峰骆驼精液的冷冻稀释液以安甑稀释液为好。我们研制的SYG2稀释液其配制方法为:取12%的煎糖溶液73%,卵黄20%,青霉素及链霉素各500~1000国际单位/毫升。如果精液以1:10~15稀释*应加入50微克/毫升促性腺激素释放激素。甘油是在精液稀释平衡后以7%的比例1次加入。
穆萨(Musa)等(1992)用两步稀释法稀释单峰骆驼的精液,第一稀释液为11%的乳糖80毫升,卵黄20毫升,第二稀释液为取第一稀释液95.5毫升,加甘油6毫升,即成为冻精稀释液。 ”
另外,采精用的器具包括采精器具、精液评价用具和稀释用具等均应清洗消毒。精子活力在如%以上者方可用于生产冻精。
2. 稀释将精液与同温度的稀释液按稀释比例混匀,检查精子活力。
3. 平衡将稀释后的精液在保温箱内逐渐降温。1小时内降低到10Y左右,然后放置在4T冰箱内平衡4小时,加入甘油,检查精子活力,将精液在0无~5T下装入2毫升玻璃安甑或塑料细管中。
4. 冷冻采用液氮熏蒸法,双峰骆驼冷冻精液的制备过程见表3-4o
5. 解冻安甑冻精可在45^-50^的温水中解冻,待精液融化后立即取出备用。
解冻后的冻精,其精子的活力不得低于30%,但经过我们的试验,用SYG2稀释后制备的冻精,解冻后活力平均为60%左右。
表口双峰鸵安甑冻精的制备过程
冷冻步骤 精液距液氮面的距离(厘米) 持续时间(分钟) 相应温度
1 3 3 -5T
2 2 2 -75T
3 1 1 -175%:
4 液氮中 3 -i欧
6.冷冻精液的保存为了保证冷冻精液的质量,防止制备好的冻精活力降低,在贮存及取用过程中必须注意以下事项。
第一,根据液氮罐保温性能的要求,定期添加液氮,罐内的精液不应露在液氮面外o一般来说,液氮量不够容’量的1/3时,就要添加。
第二,从液氮罐内取出冷冻精液时,其余分装的冷冻藉液不应提出液氮罐口外。
第三,在定期清理液氮罐时,或将精液转移到另1液氮罐时,动作越快越好,精液在空气;中暴露的时间不得超过3~5秒。
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